脂多糖诱导脓毒症小鼠心肌细胞及线粒体自噬
目的 探讨脓毒症心肌损伤时心肌细胞及线粒体自噬水平的变化.方法 雄性C57BL/J小鼠随机分为空白对照组(NC)、LPS处理6、12、24、36 h组.LPS处理组小鼠腹腔注射10 mg/kg LPS建立脓毒症模型,空白对照组注射等量生理盐水.分别于以上时间点处死小鼠,收集血液及心脏组织,提取心肌组织胞质蛋白、线粒体及线粒体蛋白,另取心肌组织进行冰冻切片;应用ELISA试剂盒测定血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)含量变化;JC-1染色结合荧光酶标仪检测LPS刺激后不同时间点线粒体膜电位变化;Westem blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、PTEN诱导激酶1(pink1)、E3泛素连接酶帕金森病蛋白(parkin)水平;免疫荧光组织化学染色检测心肌组织LC3、pink1/parkin蛋白的定位及其在不同处理组的表达差异.结果 与对照组相比,LPS诱导的脓毒症小鼠血清cTnⅠ在6h即开始明显升高;LPS处理组线粒体膜电位下降,在LPS 12 h组最低;细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ在腹腔注射LPS 12 h明显升高,然后逐渐下降;pink1/parkin在腹腔注射LPS6h明显升高,然后逐渐下降.结论 脓毒症心肌损伤时心肌细胞及线粒体自噬水平升高,自噬应激可能更早发于心肌线粒体.
脓毒症、心肌损伤、线粒体自噬、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、pink1、parkin
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R542.2;R392-33;R392.11(心脏、血管（循环系）疾病)
国家自然科学基金81470414
2016-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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