HEK293T细胞表达的单核细胞趋化蛋白1促进巨噬细胞迁移
目的 构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动的单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)真核表达载体,转染人胚肾HEK293T细胞,验证其对巨噬细胞的趋化作用.方法 小鼠基因组DNA作模板,用PCR法获得MCP-1启动子区基因片段,插入pFLAG-CMV1载体.用双酶切法和测序鉴定正确后,将构建好的病毒载体转染HEK293T细胞,用Western blot法检测MCP-1的表达,用TranswellTM实验检测转染后细胞分泌的MCP-1对巨噬细胞的趋化作用.结果 重组载体酶切鉴定在相应位置有目的片段,转染单核细胞趋化因子重组载体后的HEK293T细胞有MCP-1表达,转染后HEK293T细胞分泌的MCP-1明显增加巨噬细胞的迁移.结论 HEK293T细胞表达的MCP-1明显增强巨噬细胞的迁移.
巨噬细胞、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、真核表达载体、载体构建
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R392-33;R392.12
国家自然科学基金81370811
2016-04-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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