抗人LOC339524单克隆抗体的制备和应用

摘要：

目的 制备特异性抗人LOC339524的单克隆抗体(mAb)并进行应用.方法 将LOC339524蛋白的非糖基化抗原序列的编码基因进行三段重复表达,合成的基因克隆到质粒pET28a上.采用大肠杆菌表达系统获得LOC339524重组蛋白,以此作为免疫原免疫BALB/c小鼠,获得mAb.ELISA测定抗体特异性及效价.Western blot法鉴定LOC339524重组蛋白、免疫组织化学技术分别检测人心肌组织和H9C2细胞中LOC339524蛋白的表达,采用制备的抗体检测不同心脏病患者血清LOC339524水平.结果 筛选出2株能稳定分泌抗人LOC339524蛋白mAb的杂交瘤细胞株,5-D3和4-F8.其中5-D3效价高于4-F8,达2×106.Westem blot法、免疫组织化学技术证明5-D3能特异性识别人和大鼠LOC339524蛋白,应用制备的抗体可成功检测不同心脏病患者血清LOC339524的水平.结论 成功制备了特异性好、效价高的抗人LOC339524蛋白mAb.

关键词：LOC339524、三段重复表达抗原序列、单克隆抗体

所属期刊栏目：31

分类号：Q813.2;R392.11(生物工程学(生物技术))

资助基金：重庆市自然科学基金2013C292

在线出版日期：2016-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1693-1697,1701