RNA干扰介导Bcl-2下调促进ZR75-1和MCF-7乳腺癌细胞凋亡
目的 构建高效稳定的Bcl-2基因的RNA干扰慢病毒载体,检测Bcl-2的表达对细胞凋亡的影响.方法 构建人Bcl-2慢病毒短发夹RNA(shRNA)干扰载体Lenti-H1 shRNA,转染HEK293T细胞,通过实时定量PCR及Western blot法检测Lenti-H1 shRNA的干扰效果.Lenti-H1 shRNA与4个包装质粒共同转染HEK293T细胞,包装成慢病毒后,分别感染ZR75-1和MCF-7乳腺癌细胞;嘌呤霉素筛选2周,收集细胞进行Western blot法检测Bcl-2蛋白的水平;采用流式细胞术检测乳腺癌细胞的凋亡情况.结果 构建的Lenti-H1 Bcl-2 shRNA能够有效抑制Bcl-2蛋白的表达;流式细胞术结果显示,Bcl-2表达下调后明显促进细胞凋亡.结论 慢病毒介导的Bcl-2蛋白下调能促进乳腺癌细胞的凋亡.
Bcl-2蛋白、RNA干扰、慢病毒、细胞凋亡
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Q279;Q255;R392-33(细胞生物物理学)
国家自然科学基金81372161,81472589,31100604;北京市科技新星计划Z141102001814055;北京市自然科学基金7132155;军事医学科学院创新基金转化医学项目ZHYX003
2015-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1506-1510
