原纤毛在3T3-L1细胞向脂肪细胞分化过程中的动态变化及对脂滴生成的影响

摘要：

目的 研究原纤毛在3T3-L1前体脂肪细胞分化中的表达及对脂肪分化的影响.方法 诱导3T3-L1前体脂肪细胞向脂肪细胞分化,在分化第0天和第4天分别孵育水合氯醛以化学方式抑制原纤毛.Western blot法检测原纤毛关键蛋白驱动蛋白3a(Kif3a)、鞭毛内转运蛋白88(IFT88)和乙酰化α微管蛋白(acAT)以及脂肪分化关键蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达;免疫荧光染色检测acAT反映原纤毛数目;双萤光素酶报告基因系统检测PPARγ基因启动子活性;油红染色检测脂滴沉积程度.结果 原纤毛关键蛋白Kif3a、IFT88以及acAT在分化第0天呈高表达,分化第2天表达降低,分化第4天表达恢复至第0天水平,分化第8天又明显减少.在分化第0天给予水合氯醛,可明显抑制原纤毛关键蛋白Kif3a、IFT88以及acAT的表达及数目,显著增加PPARγ的启动子活性和蛋白表达及脂滴沉积.而在分化第4天给予水合氯醛,与溶媒对照组相比,虽也显著抑制原纤毛生成,但PPARγ启动子活性和蛋白表达及脂滴沉积无明显变化.结论 原纤毛在3T3-L1前体脂肪细胞分化过程中呈动态变化;分化早期原纤毛减少可明显增加脂滴生成能力,然而一旦分化过程被启动,原纤毛减少不影响脂滴生成.

关键词：原纤毛、3T3-L1细胞、脂肪细胞分化、脂滴生成

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分类号：R392.12;Q254

资助基金：中国博士后基金2012M521590,2013T60792;广东省自然科学基金s2013040014350

在线出版日期：2015-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1473-1478