新型免疫佐剂环二鸟苷酸的制备与纯化

摘要：

目的 制备新型免疫佐剂环二鸟苷酸(c-di-GMP)并进行纯化.方法 利用前期重组构建并在大肠杆菌中成功表达的霍乱弧菌VCA0956蛋白(含有GGDEF结构域)作为合成酶,在反应体系中采用酶促反应将2分子鸟苷酸GTP催化缩合成一分子c-di-GMP.利用反相液相色谱仪分离纯化粗产物中的c-di-GMP,柱温25℃,流动相为乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液(体积比为5:95逐渐变为30:70),流速1mL/min.结果 c-di-GMP从反应粗产物中被有效的分离纯化,同时,经质谱分析仪分析鉴定,获得高纯度的c-di-GMP.结论 成功从酶促反应体系中分离并纯化了c-di-GMP.

关键词：免疫佐剂、环二鸟苷酸、纯化、反相高效液相色谱

所属期刊栏目：31

分类号：R979.5;Q524+.5;Q524+.6;O657.7+2(药品)

资助基金：山东省自然科学基金ZR2014YL013;国家自然科学基金31370189, 31170146;公益性行业农业科研专项经费201303046

在线出版日期：2015-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1354-1357