UNC5B单克隆抗体的制备及对黑素瘤细胞体外迁移能力的影响
目的 制备非协调性分子5同源蛋白B (UNC5B)的单克隆抗体(mAb),分析其功能.方法 将UNC5B基因片段与原核表达载体pET-32a连接,连接产物转化大肠杆菌BL21 (DE3),进行原核诱导表达并纯化重组蛋白.用UNC5B重组蛋白免疫BALB/c小鼠,经杂交瘤技术筛选可稳定分泌抗UNC5B的杂交瘤细胞株,并用Western blot法、ELISA和流式细胞术鉴定.利用细胞划痕实验观察UNC5B mAb对黑素瘤细胞迁移能力的影响.结果 表达并纯化了UNC5B重组蛋白;筛选出1株高效价的2C9 mAb,通过ELISA、Western blot法和流式细胞术证实该mAb特异性识别UNC5B;划痕实验证明在netrin-1存在的条件下,UNC5B mAb可促进黑素瘤细胞迁移.结论 成功制备了UNC5B的特异性mAb,在netrin-1存在时,该抗体可促进黑素瘤细胞迁移.
非协调性分子5同源蛋白B(UNC5B)、蛋白纯化、单克隆抗体、细胞迁移
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Q813.2;Q279;R392-33;R446.61(生物工程学(生物技术))
国家自然科学基金81270593
2015-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1259-1262
