肠道病毒71型VP1蛋白在昆虫杆状病毒表达系统的表达
目的 利用昆虫杆状病毒表达系统表达肠道病毒71型VP1蛋白并对其进行纯化.方法 首先通过化学合成法合成EV71 VP1基因,然后将EV71 VP1基因插入到供体质粒pFastBac1中,构成重组质粒pFastBac1-VP1,再转入JM190感受态细菌扩增,然后提取重组质粒pFastBac1-VP1转入DH10BacTM感受态细胞,通过转座从而获得重组质粒bacmid-VP1,采用脂质体Cellfectin Reagent将重组质粒bacmid-VP1转染Sf9细胞.通过SDS-PAGE、Western blot法检测目的蛋白的水平,经镍离子亲和层析,纯化VP1蛋白.结果 SDS-PAGE及Western blot法检测获得蛋白的相对分子质量与预期结果一致.Bradford分析纯化后蛋白的浓度为70 μg/mL,纯化度达90％.结论 利用昆虫杆状病毒表达系统成功表达EV71 VP1蛋白.
EV71、VP1蛋白、昆虫-杆状病毒表达系统
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R373.2;R392-33;Q939.47(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家自然科学基金81101227;镇江市社会发展项目SH2012036
2015-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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