牛磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶单克隆抗体的制备
目的 制备牛磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)单克隆抗体(mAb),并对其特异性进行初步鉴定.方法 构建含PEPCK基因的重组质粒,将其转化大肠杆菌,并进行诱导表达,对表达产物PEPCK重组蛋白进行纯化,以PEPCK重组蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞,用间接ELISA筛选阳性克隆,获得稳定分泌抗牛PEPCK mAb的细胞株,并用Western blot法,免疫组织化学染色和免疫沉淀鉴定其特异性.结果 成功获得稳定分泌抗牛PEPCK mAb的杂交瘤细胞株.Western blot法、免疫组织化学和免疫沉淀结果表明,该抗体能与牛PEPCK蛋白特异性结合.结论 成功获得抗牛PEPCKmAb.
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、单克隆抗体、杂交瘤
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Q813.2;R392-33(生物工程学(生物技术))
“973”计划项目2009CB918904;国家自然科学基金81070671
2015-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
829-832,837
