过表达C-Src激酶结合蛋白诱导Jurkat淋巴细胞表型改变和凋亡
目的 研究上调C-Src激酶结合蛋白(CBP)表达对Jurkat细胞超微结构及相关生物学功能的影响.方法 构建CBP-EGFP融合蛋白过表达病毒载体,转染建立稳定的高表达CBP-EGFP融合蛋白的Jurkat细胞株.光学显微镜下观察细胞的基础生长状态,共聚焦显微镜观察病毒转染效率及CBP蛋白在细胞上的定位,电镜观察细胞内细胞器的复杂程度.流式细胞术检测细胞的基本参数及凋亡情况,实时定量PCR(qRT-PCR)检测CBP基因及信号转导通路中C-Src激酶(CSK)、原癌基因蛋白Vav(Vav oncoprotein) mRNA水平.结果 光镜下发现转染CBP-EGFP病毒的Jurkat细胞皱缩细胞增多,大小均一性较差.共聚焦显微镜显示细胞转染效率达到100％,同时发现CBP定位于细胞膜上.电镜可见CBP组细胞内细胞器较Jurkat细胞复杂,有线粒体,并出现大量的溶酶体样结构.与阴性组相比,转染了CBP-EGFP病毒后,死亡细胞的数量大大增加,而qRT-PCR结果显示CBP组CSK表达上调,Vav则表达下调.结论 在Jurkat细胞中,CBP蛋白高表达可以使细胞的均一性下降,凋亡细胞增多.
C-Src激酶结合蛋白、细胞器、信号转导
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R392.11;Q255;Q279
国家自然科学基金81273206;青岛市公共领域科技支撑计划项目[12-1-3-5-C-2-nSh]
2015-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
749-752,757
