甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)的CUB1、CUB2片段多克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

目的 原核表达甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)的CUB1、CUB2功能区蛋白,制备其功能区蛋白的多克隆抗体并进行鉴定.方法 利用带有CUB1、CUB2基因片段的pGEX-6P-2原核载体诱导表达GST-CUB1和GST-CUB2融合蛋白并进行纯化,将纯化后的融合蛋白作为抗原,与Freund佐剂充分混合后免疫5周龄BALB/c雌性小鼠,制备多克隆抗体;应用Western blot法检测多克隆抗体特异性,应用ELISA检测多克隆抗体效价.结果 成功表达并纯化GST-CUB1和GST-CUB2蛋白;应用其作为抗原对小鼠进行免疫后,成功制备出与其相应的多克隆抗体,且特异性强,与其他蛋白无交叉反应;间接ELISA测得CUB1抗体效价大于1:32 000,CUB2抗体效价大于1:16000.结论 成功制备了特异性强,效价高的GST-CUB1和GST-CUB2蛋白多克隆抗体.

关键词：MASP-2、CUB1和CUB2功能区片段、蛋白原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：31

分类号：R392.11;Q786

资助基金：河北北方学院校级重大课题ZD201313

在线出版日期：2015-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：689-692,696