上调小鼠骨髓来源树突状细胞FcγRⅡb表达可抑制其抗原提呈功能

摘要：

目的 构建FcγRⅡb慢病毒载体,感染小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC),观察BMDC抗原提呈功能变化.方法 小鼠骨髓细胞中提取RNA,反转录后进行PCR扩增得到FcγRⅡb目的基因,将FcγRⅡb基因插入慢病毒表达载体TRE中构建FcγRⅡb重组慢病毒载体.HEK293T细胞包装慢病毒,体外进行小鼠BMDC的诱导培养及鉴定.将慢病毒感染BMDC后,实时定量PCR检测BMDC中FcγRⅡbmRNA水平,Western blot法检测BMDC中FcγRⅡb蛋白水平,流式细胞术分析BMDC表面分子CD80、CD86、CD40、MHCⅡ的变化.结果 成功构建FcγRⅡb重组慢病毒载体,经酶切、PCR鉴定及测序鉴定成功.体外诱导培养BMDC,可见细胞表面大量树枝样突起形成.包装慢病毒感染BMDC后,FcγRⅡb mRNA和蛋白水平均较未感染BMDC增高.流式细胞术分析感染后BMDC表面分子CD80、CD86、CD40、MHCⅡ的表达量均较未感染BMDC下降.结论 DC上FcγRⅡb的过表达能够下调其抗原提呈功能.

关键词：FcγRⅡb、慢病毒、树突状细胞

所属期刊栏目：31

分类号：R392.1;R456;Q782

资助基金：国家自然科学基金81160375;宁夏医科大学校级科研项目XZ201403

在线出版日期：2015-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：664-667,671