稳定表达叶酸受体α的C26细胞株的建立
目的 建立稳定表达叶酸受体α(FRα)的C26细胞,用于FRα基因疫苗的后续研究.方法 采用脂质体转染法,将前期构建的重组真核表达质粒pcDNA3.1-FRα基因导入C26细胞,用G418加压进行筛选,并通过单克隆操作,建立稳定转染叶酸受体α基因的单克隆细胞株.利用反转录PCR及免疫荧光细胞化学染色检测稳定转染细胞中叶酸受体α基因的表达情况,并利用反转录PCR检测传代细胞中FRα基因表达的稳定性.结果 经转染、G418筛选以及单克隆化操作,得到单克隆FRα基因稳定转染细胞株,所得单克隆稳定转染细胞株可表达FRα mRNA及蛋白,并能够在多次传代后保持表达的稳定性.结论 成功构建了FRα稳定转染细胞株.
叶酸受体α、稳定转染、细胞株、表达鉴定
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R392-33;Q813.1+1
国家自然科学基金81301902,81102899
2015-06-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
644-647