myc-p62融合蛋白的表达及其对ERK磷酸化的抑制
目的 构建带myc标签的自噬标志蛋白P62基因真核表达载体,获得myc-p62融合表达蛋白,并对其功能进行初步检测.方法 利用聚合酶链式反应从乳腺文库中体外扩增人P62基因编码序列,将其与空pXJ-40-myc载体正确连接,重组质粒myc-p62转染HEK293T细胞,用Western blot法检测该融合蛋白的表达情况,并检测该蛋白对细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的影响.结果 构建得到myc-P62基因的真核表达载体,双酶切鉴定得到与预期片段大小相符的外源性基因插入片段,经测序与目的序列完全一致;经Western blot法检测,融合蛋白成功表达,并能够抑制ERK磷酸化.结论 成功表达了myc-p62融合蛋白并能抑制ERK磷酸化.
p62基因、真核表达载体、自噬、ERK磷酸化
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R392-33;Q786
国家自然科学基金31100604;北京市科技新星计划Z141102001814055;北京市自然科学基金7132155;军事医学科学院创新基金转化医学项目ZHYX003
2015-06-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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