肝细胞特异性杀伤载体的构建和应用
目的 间充质干细胞(MSC)有重要的免疫调节和组织再生作用,但其治疗肝损伤的机制尚不完全清楚,既可能通过旁分泌因子调节炎症,也可直接转分化为肝细胞.为明确这两种机制,拟构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动的膜定位绿色荧光蛋白(GFP)与白蛋白启动子调控的PE40毒素的共表达质粒,以期杀伤转染MSC中向肝细胞转分化的细胞.方法 用PCR获得GFP以及DLL1(Delta-like 1)跨膜区基因片段,融合成膜定位GFP基因并插入pFlag-CMV-1载体.将白蛋白基因启动子和PE40基因片段插入已构建好的膜定位GFP序列下游,构建真核表达载体,荧光显微镜检测GFP的表达.应用可表达白蛋白的人正常肝脏细胞检测该载体对肝细胞的杀伤.结果 成功构建肝细胞特异性杀伤载体,该载体转染后对正常肝脏细胞具有杀伤作用,提示该载体可用于探索MSC治疗肝损伤的机制.结论 成功构建能特异性杀伤肝细胞的载体.
肝细胞、绿色荧光蛋白、PE40毒素、载体构建
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Q255;R575.2+9(细胞生理学)
国家自然科学基金重大研究计划培育项目91029731;国家自然科学基金重点项目81030010
2015-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
491-495
