制备GP73多克隆抗体并建立GP73胶乳增强免疫比浊法

摘要：

目的 运用胶乳微球标记抗高尔基体蛋白73(GP73)抗体,并初步建立GP73的胶乳增强免疫比浊法.方法 用人工重组GP73蛋白免疫新西兰兔,制备多克隆抗体,并将纯化成功后的抗体蛋白共价偶联到胶乳微球上;优化偶联条件,制备免疫胶乳,建立GP73胶乳增强免疫比浊测定法.结果 制备的纯化抗GP73多克隆抗体的效价达到16000,用其致敏的胶乳微球在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐/N-羟基琥珀酰亚胺磺酸钠盐(EDAC/NHS)浓度为10 mg/mL、反应溶液为PBS (pH =6)、室温反应3h,偶联率最高.所建立的颗粒增强免疫比浊法灵敏度和特异性良好,线性范围在(6.25 ～200) ng/mL,检测下限在10 ng/mL.结论 成功纯化出GP73多克隆抗体,制备GP73免疫胶乳微球颗粒,建立GP73胶乳增强免疫比浊法.

关键词：GP73抗体、胶乳微球、化学偶联、免疫比浊法

所属期刊栏目：31

分类号：R392.11;R735.7;R392-33

资助基金：广东省科技计划项目2013B0218003

在线出版日期：2015-04-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：255-258