生殖支原体脂质相关膜蛋白诱导胎盘滋养层细胞表达血红素氧合酶1从而负调控细胞因子分泌
目的 观察生殖支原体脂质相关膜蛋白(LAMP)能否诱导胎盘滋养层细胞表达血红素氧合酶1(HO-1),从而影响细胞因子的产生.方法 体外培养胎盘滋养层细胞,用0.5~5μg/mL LAMP作用4~12h.实时定量PCR和Western blot法分别检测HO-1 mRNA和蛋白的表达以及核因子相关因子2(Nrf2)的核转位;2',7'-二氯二氢荧光黄二乙酸酯(H2DCFDA)检测活性氧(ROS)产生;采用N-乙酰半胱氨酸(NAC)或Nrf2 siRNA处理滋养层细胞,观察其对HO-1表达的影响.采用HO-1的激动剂钴原卟啉(CoPP),抑制剂锌原卟啉(ZnPP)或HO-1 siRNA处理细胞,ELISA检测处理前后LAMP对诱导肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)分泌的影响.结果 LAMP能诱导滋养层细胞HO-1 mRNA和蛋白表达,并能诱导其产生ROS以及促进Nrf2核转位.ROS抑制剂NAC预处理后,可明显降低HO-1的表达水平以及细胞核内Nrf2含量.同时,Nrf2siRNA转染后,HO-1表达显著减少.采用ZnPP处理滋养层细胞,或RNA干扰HO-1表达后,可促进LAMP诱导滋养层细胞分泌TNF-α和IL-1β,而CoPP处理能进一步降低TNF-α和IL-1β水平.结论 LAMP能通过ROS/Nrf2诱导滋养层细胞表达HO-1,从而抑制细胞因子的过度分泌.
生殖支原体、脂质相关膜蛋白、血红素氧合酶-1、滋养层细胞
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R518.9;R392-33;R711.32(传染病)
国家自然科学基金31000091,81072418;特殊病原体防控湖南省重点实验室资助项目湘科计字[2014]5号,湘教通[2012]312号;湖南省科研条件创新专项2013TT2013
2015-04-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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