肺泡巨噬细胞TLR4/MyD88信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤
目的 探讨肺泡巨噬细胞Toll样受体4/髓样分化因子88 (TLR-4/MyD88)信号通路在呼吸机相关性肺损伤中的作用.方法 30只成年SD大鼠行经口气管插管,给予40 mL/kg潮气量通气240 min,建立呼吸机相关性肺损伤模型,机械通气结束后,使用4℃ PBS经气管导管缓慢注入并回收支气管肺泡灌洗液(BALF),提纯肺泡巨噬细胞.收集并培养肺泡巨噬细胞,随机分为3组:PBS刺激组(CON组);TNF-α刺激联合PBS组(STI组);TNF-α刺激联合抗TLR4单克隆抗体(mAb)干预组(ANT组);每组8个样本.CON组细胞用PBS结合2h后,继续用PBS培养16 h;STI组细胞用PBS结合2h后,采用20 ng/mL TNF-α培养16 h;ANT组细胞用PBS液及TLR4 mAb结合2h后,用20 ng/mL TNF-α培养16 h.ELISA检测各组上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的表达;反转录PCR检测各组肺泡巨噬细胞TLR4、TLR9、髓样分化因子88 (MyD88)、核因子κB (NF-κB)的mRNA表达,Western blot法检测各组肺泡巨噬细胞TLR4、TLR9、MyD88、NF-κB的蛋白表达.结果 与CON组比较,STI组及ANT组细胞培养上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度明显增高;STI组肺泡巨噬细胞TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κBmRNA表达水平与蛋白表达水平明显增高;ANT组肺泡巨噬细胞TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平与蛋白表达水平无明显变化.与STI组比较,ANT组细胞培养上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度明显降低;肺泡巨噬细胞TLR4 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA表达水平与蛋白表达水平明显下调.3组TLR9 mRNA与蛋白表达水平相近.结论 炎症因子刺激可调节TLR4、MyD88、NF-κB分泌增加,肺泡巨噬细胞TLR4-MyD88信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤.
呼吸机相关性肺损伤、肺泡巨噬细胞、Toll样受体4、Toll样受体9、TNF-α
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R392.12;R563
国家自然科学基金81060008
2015-04-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
182-185,189
