沉默癌胚抗原相关细胞黏附分子1基因抑制SHG44人胶质瘤细胞增殖并促进其凋亡
目的 采用RNA干扰技术(RNAi)沉默癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)基因的表达,观察沉默效果及沉默CEACAM1表达后对SHG44人胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法 设计并化学合成针对CEACAM1的3对小干扰RNA(siRNA),脂质体法瞬时转染SHG44细胞.流式细胞术(FCM)检测转染效率,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测siRNA转染前后SHG44细胞中CEACAM1 mRNA的表达,Western blot法检测CEACAM1蛋白的表达.CCK-8法检测SHG44细胞细胞增殖活性,annexin Ⅴ-FITC/PI染色结合FCM检测SHG44细胞凋亡,Western blot法检测cleaved caspase-3和裂解型多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(cleaved PARP)的变化.结果 CEACAM1 siRNA转染效率达85％.与空白对照组和阴性对照组比较,qRT-PCR及Western blot结果显示,3组特异性siRNA转染48 h后,在mRNA和蛋白水平上CEACAM1的表达均降低,以CEACAM1-siRNA3效果最明显.siRNA组SHG44细胞的增殖能力较正常对照组明显下降,凋亡细胞比例增加.沉默CEACAM1表达可以上调cleaved caspase-3和cleaved PARP的表达.结论 沉默CEACAM1基因表达可有效抑制SHG44胶质瘤细胞的增殖,促进细胞凋亡.
癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)、胶质瘤、RNA干扰、增殖、凋亡
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R730.264;R392-33(肿瘤学)
陕西省教育厅科研基金11JK-0712
2015-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
23-26,31
