表达丙型肝炎病毒核心蛋白的人肝癌稳定转染细胞株的建立与鉴定

摘要：

目的 建立能表达丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV core)的人肝癌细胞SMMC-7721的稳定转染细胞株.方法 构建含目的基因HCV core的重组质粒,转染HEK293T细胞,包装获得含ZsGreen和HCV core基因的慢病毒后,感染SMMC-7721人肝癌细胞,采用实时荧光定量PCR检测HCV core mRNA表达,采用免疫荧光细胞化学染色和Western blot法检测HCV core蛋白表达,筛选稳定表达HCV core的细胞株.结果 质粒酶切和序列测定证实重组载体构建正确;慢病毒包装48 h后可见清晰ZsGreen表达,感染SMMC-7721细胞后筛选获得稳定转染的细胞株,实时荧光定量PCR检测到HCV core mRNA,免疫荧光细胞化学染色和Western blot法均检测出HCV core蛋白表达.结论 成功构建了表达HCV core蛋白的SMMC-7721人肝癌细胞的稳定转染细胞株.

关键词：丙型肝炎病毒、核心蛋白、肝癌细胞株、慢病毒、稳定表达

所属期刊栏目：30

分类号：R373.2+1;R735.7;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：陕西省科技统筹创新工程计划2014TCL03-08;中国肝炎防治基金会天晴肝病研究基金CFHPC20132043

在线出版日期：2014-12-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1137-1141