S100A9蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定
目的 制备S100A9重组蛋白及其单克隆抗体(mAb),并对抗体进行特异性鉴定.方法 以成人肝cDNA表达文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-S100A9和pET-32a-S100A9.融合蛋白在大肠杆菌中表达,纯化后以His-S100A9作为免疫原制备鼠mAb.采用ELISA和Western blot法鉴定筛选抗体.挑取杂交瘤细胞株制备腹水并纯化,采用Western blot法和间接免疫荧光染色鉴定mAb的特异性.结果 GST-S100A9和His-S100A9融合蛋白均成功构建表达.共筛选到抗S100A9杂交瘤细胞18株,其中15株在Western blot检测中与重组蛋白呈强阳性反应,3株呈弱阳性反应.2株可识别肝癌组织间隙液中的S100A9天然蛋白.结论 成功地制备出多株抗S100A9的mAb.
S100A9、单克隆抗体、杂交瘤、细胞融合
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R392.11;Q813.2
国家重点基础研究发展计划9732011CB915502;国家高技术研究发展计划8632012AA020201;蛋白质组学国家重点实验室SKLP Y200907
2014-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
956-959
