热休克蛋白16.3多克隆抗体的制备
目的 大肠杆菌表达Hsp16.3,制备其多克隆抗体.方法 设计引物,从H37Rv基因组中扩增出目的片段Hsp16.3,pET28a-Hsp16.3质粒的构建、克隆和表达.对 His-Hsp16.3进行诱导、表达和纯化.用纯化好的蛋白免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,用ELISA检测抗血清中多抗的效价,用Western blot法检测多克隆抗体的生物活性.结果 重组质粒pET28a-Hsp16.3在E.coli BL21(DE3)中成功表达,SDS-PAGE结果显示在His-Hsp16.3的相对分子质量(M)约为20 000.制备的多克隆抗体效价为1∶800,且特异性较好.结论 成功的克隆、表达、纯化出His-Hsp16.3,并且成功制备了抗Hsp16.3多克隆抗体.
抗体、基因表达、结核分枝杆菌
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R392.11;R392-33;S852.4+3;Q344+.13;R378.91+1
2014-06-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
848-851