河南华溪蟹金属硫蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

目的 制备小鼠抗河南华溪蟹金属硫蛋白(MT)单克隆抗体(mAb),并鉴定其免疫学特性.方法 分别利用小泛素样修饰蛋白(SUMO)融合表达系统和碱性磷酸酶(phoA)分泌表达载体制备河南华溪蟹重组蛋白SUMO-MT和His-MT,以SUMO-MT为免疫抗原、His-MT为检测抗原,利用杂交瘤技术建立抗河南华溪蟹MT mAb杂交瘤细胞株.采用间接ELISA测定mAb腹水效价,Western blot法、Dot-ELISA分析mAb的特异性.结果 成功建立了2株稳定分泌抗MT蛋白的mAb杂交瘤细胞株,分别命名为mAb-MT2和mAb-MT3,均属于IgG1亚类.腹水效价分别为1∶500000、1∶1000000,Western blot和Dot-ELISA结果证实2株mAb均能特异性识别重组MT和内源性MT.结论 成功制备了具有较高特异性的河南华溪蟹MT mAb.

关键词：河南华溪蟹、金属硫蛋白、单克隆抗体

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分类号：Q813.2;R392.11(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2014-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：844-847,855