波形蛋白基因转染增强SW780人膀胱癌细胞的侵袭力

摘要：

目的 构建人波形蛋白(vimentin)基因的真核表达载体,转染SW780入膀胱癌细胞,检测vimentin上调对SW780细胞侵袭能力的影响.方法 PCR扩增人vimentin基因的cDNA序列,将其插入pcDNA3.1真核表达载体中,酶切鉴定并测序验证重组质粒pcDNA3.1-vimentin后,转染人膀胱癌SW780细胞.Westem blot法检测vimentin及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,明胶酶谱分析MMP-9活性,TranswellTM实验检测vimentin对膀胱癌细胞侵袭能力的影响.结果 酶切鉴定有预期目的片段,测序证实重组质粒pcDNA3.1-vimentin构建成功.Westem blot法检测提示pcDNA3.1-vimentin转染SW780细胞后,vimentin 与MMP-9表达水平均上调.明胶酶谱表明vimentin能够显著促进SW780细胞MMP-9的分泌.TranswellTM实验提示vimentin能显著增强SW780细胞的侵袭转移能力.结论 成功构建了pcDNA3.1-vimentin真核表达载体并将其成功转染膀胱癌SW780细胞.Vimentin上调能够增强SW780细胞的侵袭能力,可能与上调MMP-9的表达及促进MMP-9分泌有关.

关键词：波形蛋白、膀胱癌细胞、SW780、侵袭转移

所属期刊栏目：30

分类号：R392-33;Q25;Q279

在线出版日期：2014-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：713-716