11型HPV E7蛋白的表达及其多克隆抗体的制备

摘要：

目的 构建人11型乳头瘤病毒(HPV 11)E7蛋白的原核表达载体,表达纯化后制备抗HPV 11 E7蛋白的多克隆抗体.方法 构建pGEX-4T2-HPV11 E7原核表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导大肠杆菌表达可溶性融合蛋白GST-HPV11 E7,纯化获取11型HPVE7蛋白.将HPV11 E7蛋白免疫新西兰大白兔获得抗HPV11E7的多克隆抗体,用蛋白G琼脂糖纯化获得IgG型多克隆抗体.Western blot法及免疫荧光染色检测该抗体的效价及特异性.结果 SDS-PAGE结果显示,经IPTG诱导6h后可表达出高水平可溶性GST-HPV11 E7融合蛋白.纯化后免疫新西兰大白兔获得抗HPV11 E7的血清,纯化获得了IgG型多克隆抗体.Western blot及免疫荧光染色结果显示,兔抗HPV11E7 IgG具有效价高和特异性强的特点.结论 成功表达了HPV11 E7蛋白并制备了效价较高、特异性较好的IgG型兔抗HPV11 E7蛋白多克隆抗体.

关键词：人乳头瘤病毒、E7蛋白、原核表达、多克隆抗体

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分类号：R392.11;Q786;R373

资助基金：国家自然科学基金面上项目81071302;国家自然科学基金青年基金81000698;浙江省卫生高层次创新人才培养计划2007年

在线出版日期：2014-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：618-622