猪链球菌H因子结合蛋白截短体的表达、纯化及其结合人血清IgG的活性分析

摘要：

目的 构建带His标签的2型猪链球菌H因子结合蛋白(Fhb)截短表达片段Fhb-N(45-344aa)和Fhb-C(345-664aa)的重组质粒,并在大肠杆菌中表达,获得高纯度的重组蛋白,鉴定其与人血清IgG(hIgG)结合的活性.方法 以05ZYH33基因组为模板并设计引物扩增目的片段,构建His-Fhb-N和His-Fhb-C重组表达质粒,利用亲和层析纯化目的蛋白并用Western blot法进行验证.蛋白G亲和层析柱从健康人血清中纯化人IgG(hIgG),Western blot法和生物膜干涉(BLI)鉴定和分析His-Fhb与hIgG结合的活性.结果 成功构建了带His标签的原核表达质粒并获得了His-Fhb-N和His-Fhb-C截短表达蛋白,验证出Fhb特异性地与hIgG结合,且结合区域位于Fhb-N(45-344aa).结论 Fhb能够结合hIgG,结合区域位于Fhb-N.

关键词：2型猪链球菌、Fhb、原核表达、人血清IgG

所属期刊栏目：30

分类号：Q786;R392.11;S852.611(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30870091

在线出版日期：2014-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：537-541