福氏志贺菌5a型M90T株GAPDH蛋白多克隆抗体的制备和鉴定

摘要：

目的 制备高效的福氏志贺菌5a M90T3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的多克隆抗体,并对其特异性进行评价.方法 提取M90T的全基因组,采用PCR法扩增M90T中的基因gapA克隆到原核表达载体pET-24中,重组质粒转入到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,条件优化后纯化GAPDH-His融合蛋白.以纯化的融合蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,制备该蛋白的多克隆抗体.Western blot法、ELISA鉴定获得的抗血清.结果 成功构建了原核表达载体pET24a-gapA,通过一系列诱导条件的优化,确定可溶性条件为30℃、1mmol/L IPTG诱导2h.用纯化的融合蛋白GAPDH-His作为抗原免疫小鼠制备多克隆抗体,Western blot法、ELISA证明多克隆抗体制备成功.结论 成功制备了福氏志贺菌5a M90T特异性的小鼠多克隆抗体.

关键词：福氏志贺菌5aM90T、3-磷酸甘油醛脱氢酶、多克隆抗体

所属期刊栏目：30

分类号：R392-33;R378.2+5

资助基金：国家自然科学基金30970122

在线出版日期：2014-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：407-410