抗人CA125单克隆抗体的制备、鉴定及化学发光体系的建立

摘要：

目的 制备抗人糖抗原125(CA125)单克隆抗体(mAb),并建立化学发光免疫分析法检测体系.方法 将人CA125抗原免疫小鼠,通过细胞融合、筛选后得到杂交瘤细胞株.经细胞扩大培养及纯化获得mAb,鉴定其特异性、纯度、亚型及效价,并建立双抗体夹心ELISA.分别对包被缓冲液、包被浓度和加样模式进行优化和选择后,建立化学发光免疫分析法检测体系,并对其进行评估和血样的测定.结果 获得3株抗人CA125的杂交瘤细胞株(30-1-4、31-1-5、43-1-6),不与CA199、CA50、CA724交叉,效价在1∶108以上,用30-1-4和31-1-5建立的化学发光免疫分析法经优化后,检测范围为0～1 000 U/mL,最低检测限为0.72 U/mL,与罗氏试剂检测结果的相关系数大于0.90.结论 成功制备了抗人CA125 mAb,建立并优化了人CA125的化学发光免疫分析法检测体系,为CA125检测及卵巢癌的诊断奠定了基础.

关键词：CA125、单克隆抗体、夹心ELISA、化学发光免疫分析法

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分类号：R392.11;R446.61;Q813.2

资助基金：黑龙江省发展高新技术产业专项资金FW11C201;黑龙江省应用技术研究与开发计划项目GC13C122

在线出版日期：2014-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：294-298