miR-145在转染的HeLa细胞中的表达及其对CDK6的靶向抑制
目的 构建miR-145高效表达载体,研究其对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.方法 人工合成miR-145基因序列,构建真核重组质粒pcDNATM6.2-GW-miR-145,并转染-HeLa细胞,将HeLa细胞分为转染miR-145组、空载体组和未经处理的HeLa细胞组.采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和Western blot法分别检测miR-145及其下游靶基因细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)在各组中的表达,采用MTT法检测miR-145对HeLa细胞增殖活性的影响.结果 经测序和qRT-PCR分析鉴定证明重组质粒pcDNATM6.2-GW-miR-145构建成功,qRT-PCR和Western blot结果显示转染miR-145组的HeLa细胞中CDK6的表达水平明显降低,MTT试验结果显示转染miR-145的HeLa细胞其增殖活性明显受到抑制(P<0.05).结论 成功构建miR-145真核表达载体pcDNATM6.2-GW-miR-145,miR-145能够抑制宫颈癌HeLa细胞中CDK6的表达.
宫颈癌、miR-145、真核表达载体、CDK6
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R737.33;R392-33(肿瘤学)
陕西省科学技术研究发展计划2011K13-02-06
2014-01-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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