EGFP-Sam68融合蛋白在HeLa细胞的表达和定位

摘要：

目的 克隆有丝分裂Src相关蛋白p68(Sam68)基因cDNA全长,构建Sam68真核绿色荧光蛋白表达载体,并确定其在HeLa中的表达和定位.方法 提取HeLa细胞总RNA,RT-PCR扩增Sam68基因片段,经酶切鉴定及测序正确后,克隆到真核绿色荧光蛋白表达载体(pcDNA3.0-EGFP)上,并转染HeLa细胞,Western blot法检测Sam68表达,免疫荧光细胞化学染色观察其细胞定位.结果 酶切和测序证实Sam68正确插入pcDNA3.0-EGFP载体中,且载体正确表达了EGFP-Sam68融合蛋白,该蛋白定位在HeLa细胞核内.结论 成功构建了真核表达载体pcDNA3.0-EGFP-Sam68.

关键词：有丝分裂Src相关蛋白p68、真核表达、基因克隆、载体构建

所属期刊栏目：30

分类号：R392-33;Q782;Q786

资助基金：国家自然科学基金31200121,31300145,31310103018

在线出版日期：2014-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：270-273