一种小鼠睾丸细胞涂片的快速制备方法

摘要：

目的 建立一种用于免疫荧光实验的小鼠睾丸细胞涂片的快速制备新方法.方法 分别给出生后16、21、28 d和120 d的小鼠腹腔注射秋水仙素,3h后取睾丸组织剔除白膜,分离曲精小管进行剪碎,加入冷PBS重悬细胞,过滤,并用冷PBS洗涤细胞3次,然后低渗处理,最后经多聚甲醛固定后铺片.对细胞核进行DAPI染色,并以21 d小鼠睾丸涂片为例进行免疫荧光实验,检测所制备的细胞涂片的质量.结果 所制备的小鼠睾丸细胞涂片经DAPI染色,每张细胞涂片均分布大量生殖细胞,背景清晰,根据细胞核的大小与着色,可初步判断生殖细胞类型;用不同发育阶段小鼠所制备的睾丸细胞涂片,细胞分布类型有很大差异,其中28 d小鼠制备的睾丸细胞涂片中生殖细胞类型最多;以21 d小鼠睾丸细胞涂片为例进行免疫荧光实验,红色和绿色荧光标记的目标蛋白在精母细胞中表达清晰,背景干净,说明所制备的细胞涂片适合于免疫荧光检测.结论 成功建立了一种快速制备小鼠睾丸细胞涂片的新方法.

关键词：小鼠睾丸、细胞涂片、低渗处理、免疫荧光技术、精子发生

所属期刊栏目：30

分类号：R392-33;R321.1

资助基金：国家自然科学基金81170615;湖南省科技厅项目S2010R1040

在线出版日期：2014-03-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：202-205