抗人CA15-3单克隆抗体的制备、鉴定及化学发光检测体系的建立
目的 获得抗人CA15-3单克隆抗体(mAb),建立CA15-3双抗体夹心化学发光检测体系.方法 人CA15-3糖抗原免疫小鼠后,通过细胞融合,筛选到阳性杂交瘤细胞.杂交瘤细胞扩大培养后,纯化获得抗CA15-3的mAb.对抗体进行纯度、效价、表位和亚型的鉴定并建立双抗体夹心检测CA15-3化学发光体系,对该体系进行准确度、最低检测限、线性、重复性与特异性评估.结果 获得5株阳性信号较强的杂交瘤细胞(分别为#3-1-3、#5-2-2、#11-2-2、#12-1-3和#16-1-3).其分泌的抗体效价均大于10-8 g/mL,轻链均为κ链,重链#3-1-3为IgG2a、#5-2-2与#12-1-3为IgG2b、#11-2-2与#16-1-3为IgG3.双抗体夹心体系在(0～300) U/mL范围内线性关系良好,其准确度的回收率为97.45％;最低检测限为0.59 U/mL;线性相关系数为0.9978;低高值的变异系数(CV)均小于10％;与肿瘤标志物AFP、CEA、CAS0、CA19-9和CA72-4均不交叉.结论 成功制备了抗人CA15-3 mAb,建立了双抗体夹心检测CA15-3化学发光体系.
肿瘤标志物、糖抗原CA15-3、单克隆抗体、化学发光免疫分析
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R392.11;R392-33;Q813.2;R446.61
黑龙江省发展高新技术产业专项资金FW11C201;黑龙江省应用技术研究与开发计划GC13C122
2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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