鸡肺表面活性蛋白A的表达及其多克隆抗体的制备

摘要：

目的 表达鸡肺表面活性蛋白A(cSP-A)重组蛋白,并制备鼠抗cSP-A多克隆抗体.方法 人工合成cSP-A的凝集素糖识别区(CRD)基因(cSP-A-CRD),亚克隆到pGEX-6P-1载体中进行原核表达,对表达产物进行鉴定.切胶纯化法纯化重组蛋白,并免疫小鼠制备抗cSP-A多克隆抗体,ELISA检测抗体效价,Western blot法、免疫荧光组织化学染色和ELISA鉴定该抗体的特异性和适用范围.结果 获得鼠抗cSP-A血清,效价达到105;Western blot法结果表明多抗血清具有良好的特异性和反应性,并可用免疫荧光组织化学技术检测鸡肺上皮细胞表达的cSP-A和用间接ELISA检测鸡肺灌洗液中存在的水溶性cSP-A蛋白.结论 成功表达了cSP-A重组蛋白并制备了小鼠抗cSP-A多克隆抗体.

关键词：鸡肺表面活性蛋白A、糖识别区、原核表达、多抗

所属期刊栏目：30

分类号：R392.11;S831.99

资助基金：安徽省教育厅自然科学基金重点项目KJ2012A112

在线出版日期：2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：63-65,70