牛胚胎骨骼肌卫星细胞的分离、培养及诱导分化
目的 分离培养鲁西黄牛胚胎骨骼肌卫星细胞,并研究其生物学特性.方法 取30 ～ 50 d龄鲁西黄牛胚胎四肢骨骼肌,联合Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶及差速贴壁法分离获得骨骼肌卫星细胞,通过免疫细胞化学染色和RT-PCR检测卫星细胞表面标志desmin、MyoD、c-Met、Myf5、pax7,并研究其生物学特性.结果 鲁西黄牛卫星细胞传代培养至15代以上,冻存后细胞活率为97.90％士0.96％；免疫细胞化学染色检测卫星细胞标记物desmin,MyoD呈阳性表达；RT-PCR检测desmin、c-Met、Myf5、pax7呈阳性表达；克隆形成率为56.39％士1.41％；染色体核型分析显示分离培养的细胞均来源于正常牛胚胎个体；通过不同的诱导剂将牛卫星细胞成功地诱导为成骨细胞和神经元样细胞,分别进行茜素红,甲苯胺蓝染色呈阳性表达,RT-PCR检测成骨细胞标记物osteopontin,Ⅰ型胶原蛋白和神经细胞标记物MAP2和nestin均呈阳性表达.结论 本试验成功地分离获得了牛卫星细胞,并具有自我更新增殖和多向分化潜能.
鲁西黄牛胚胎、骨骼肌卫星细胞、增殖能力、诱导分化
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S823;R392-33;R392.12;Q254;Q813.1+1(家畜)
转基因生物新品种培育科技重大专项2011ZX08009-003-006,2011ZX08012-002-06;基本科研业务项目2012z1072;国家家养动物种质资源平台项目2012年
2013-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
1196-1199,1204
