父系表达基因10(PEG10)单克隆抗体的制备和鉴定
目的 获得印记基因父系表达基因10(PEG10)单克隆抗体(mAb),为进一步研究PEG10的功能以及肝癌的实验室诊断奠定基础.方法 采用细胞融合技术,以PEG10抗原免疫BALB/c小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过多次阳性筛选和有限稀释,建立了抗人PEG10 mAb杂交瘤细胞株.采用间接ELISA和Southern biotech试剂盒对mAb的特性进行鉴定,采用Western blot法及免疫组织化学染色验证mAb与肝癌细胞内源性PEG10蛋白的结合.结果 成功建立2株稳定分泌抗PEG10蛋白的mAb杂交瘤细胞株,分别命名为3E8和3F3,均属IgG1亚类,κ型,且无交叉反应.Western blot法及免疫组织化学实验证实,mAb 3E8均能特异性结合肝癌细胞内源性PEG10蛋白.结论 成功制备了效价高、特异性好的PEG10 mAb,该抗体有可能用于肝癌的实验室诊断.
父系表达基因10、抗体、单克隆抗体
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R392.11;Q813.2;R446.61;R392-33
江苏省卫生厅课题H200758
2013-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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