肥大细胞对布鲁菌S2株的模式识别及活化效应的体外研究

摘要：

目的 探讨体外培养的肥大细胞对猪布鲁菌S2株的模式识别及活化效应.方法 骨髓来源的肥大细胞在体外感染猪布鲁菌S2株,瑞氏-姬姆萨染色法观察肥大细胞形态学变化,甲苯胺蓝染色法观察肥大细胞脱颗粒情况；间接ELISA检测S2株感染后1h和12 h肥大细胞释放组胺、IFN-γ、IL-12的含量；激光共聚焦显微镜检查肥大细胞对S2株的摄取状态；RT-PCR法观察S2株感染后12h和24h肥大细胞TLR4和TLR8基因的mRNA的表达；流式细胞术观察S2株感染后24h肥大细胞TLR4和TLR8蛋白的表达.结果 感染猪布鲁菌S2株的肥大细胞形态出现了明显的变化,S2株感染后1h即出现明显的脱颗粒现象；S2株感染后1h、12 h肥大细胞上清中组胺含量明显高于正常对照组(P＜0.05),未检测到IFN-γ、IL-12;共聚焦显微镜检查发现感染30 min和1hS2株主要黏附在肥大细胞表面,而未被肥大细胞摄入到细胞内；S2株感染12 h后肥大细胞TLR4mRNA的表达明显高于正常对照组,24h时表达又减弱,和正常对照组相比,S2株感染24 h时肥大细胞TLR4蛋白的表达增加；S2株感染12 h和24 h后肥大细胞TLR8 mRNA和蛋白的表达无变化.结论 S2株能黏附在肥大细胞的表面并能激活肥大细胞,引起其脱颗粒,释放组胺,但在实验观察的时间点内未见IFN-γ和IL-12的分泌,其机制可能是S2株通过TLR4被肥大细胞识别,但不能被肥大细胞摄取.

关键词：肥大细胞、猪布鲁菌S2株、Toll样受体4、Toll样受体8

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分类号：R392.11;S852.614

资助基金：河北省自然科学基金C2011204008;河北大学医学学科专项资金建设项目2012A2005

在线出版日期：2013-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1137-1140,1146