T细胞活化连接蛋白脂筏定位功能缺失影响T细胞内CD59信号转导的功能

摘要：

目的 用前期构建好的T细胞活化连接蛋白(LAT)-EGFP质粒,基因点突变技术使LAT-EGFP的棕榈酰化位点突变,使LAT-EGFP-M(棕榈酰化位点突变的LAT-EGFP)的细胞膜定位功能缺失,抗体交联CD59后观察T细胞信号活化状态的改变.方法 采用电转染的方法转染Jurkat细胞,抗体交联CD59后,共聚焦荧光显微镜下观察LAT分布情况的变化；用噻唑蓝(MTT)比色法检测抗体交联前后各组Jurkat细胞增殖情况差别；应用ELISA检测各组细胞上清中IL-2的变化水平；用Westernblot技术检测抗体交联后LAT-EGFP和LAT-EGFP-M的磷酸化程度.结果 抗体交联CD59之后,LAT-EGFP-M较LAT-EGFP相比不能定位聚集于CD59所在的脂筏区域,并且转染了突变LAT-EGFP-M质粒的Jurkat细胞增殖速度和IL-2分泌能力低于转染LAT-EGFP质粒、转染空载体EGFP-N3及未转染的细胞.LAT-EGFP-M的磷酸化程度远低于LAT-EGFP.结论 棕榈酰化位点缺失的LAT会减弱CD59在T细胞中的信号转导功能.

关键词：CD59、T细胞活化连接蛋白、棕榈酰化、T淋巴细胞

所属期刊栏目：29

分类号：R392.11;R392-33;R466.61

资助基金：国家自然科学基金81273206

在线出版日期：2013-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1121-1124,1128