人成纤维细胞生长因子-21单克隆抗体的制备及抗原表位的确定

摘要：

目的 制备小鼠抗人成纤维细胞生长因子(hFGF)-21单克隆抗体(mAb),通过细菌展示确定该mAb的抗原表位.方法 用hFGF-21作为检测和免疫抗原,间接ELISA筛选分泌抗人hFGF-21 mAb的杂交瘤细胞株；用FITC标记该mAb,并克隆hFGF-21的不同片段到展示载体Apex上,通过流式细胞仪筛选其抗原表位.结果 成功筛选出1株抗hFGF-21抗体的细胞株,其分泌抗体重链的亚型为IgG 2b,轻链为Kappa链；该杂交瘤细胞株腹水的效价为1:4.096×106；传30代及液氮中保存3个月,该细胞株能稳定分泌抗hFGF-21 mAb,且效价稳定；Western blot法检测证明该抗体与人FGF-21有很好的特异性；该mAb与小鼠FGF-21有交叉反应；通过流式细胞仪对抗原表位的筛选,该mAb可与hFGF-21下游的第107～121个氨基酸反应.结论 成功的制备出特异性、高稳定性的小鼠抗hFGF-21 mAb,确定了该mAb的抗原表位在第107～121位氨基酸.

关键词：人成纤维细胞生长因子-21、单克隆抗体、细菌展示、流式细胞术

所属期刊栏目：29

分类号：R392.12;R392.11;Q813.2

资助基金：东北农业大学博士启动基金2010RCB52

在线出版日期：2013-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：834-837