Oct4腺病毒真核表达载体的构建及对心肌再生的作用
目的 构建八聚体结合转录因子4(0ct4)腺病毒真核表达载体pAV.Exld.-CMV> mOCT4/IRES/eGFP,探讨Oct4腺病毒载体对小鼠心肌再生的作用.方法 利用Gateway(R)技术构建pAV.Exld.-CMV> mOCT4/IRES/eGFP载体,腺病毒包装后,用微量进样器直接注射到小鼠心肌,利用RT-PCR、免疫荧光分别检测心肌组织中Oct4的表达,HE染色检测Oct4表达后心肌组织是否正常.构建小鼠心梗模型,HE染色鉴定,在梗死区周围直接注射Oct4腺病毒载体,4周后Western blot法检测心肌梗死区肌钙蛋白的表达.结果 免疫荧光法检测到外源性Oct4在心肌细胞核中表达呈红色荧光,RT-PCR在Oct4腺病毒组中可检测到Oct4的表达,而空病毒组与对照组则检测不到;HE染色结果表明Oct4在活体心肌表达后心肌组织形态正常,心肌梗死区周围注射Oct4腺病毒载体4周后肌钙蛋白在Oct4组的表达量与对照组、空病毒组比较有明显差异(P<0.5).结论 外源Oct4可在活体心肌中表达,能促进梗死区心肌的再生.
Oct4载体、腺病毒、心肌梗死、心肌再生、心肌修复
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R392.12
重庆市卫生局医学科学技术研究重点项目2009-1-51
2013-04-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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