MASP-2的EGF和SP功能区蛋白表达及其多克隆抗体制备

摘要：

目的:克隆并原核表达甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)的EGF、SP功能区蛋白,制备其多克隆抗体,初步分析两个功能区蛋白的免疫原性.方法:从人胎肝组织提取总RNA,反转录得到cDNA作为模板分别扩增MASP-2的EGF、SP片段基因,再分别连接至pGEX-6P-2表达载体诱导表达GST融合蛋白;分离纯化融合蛋白后免疫适龄BALB/c小鼠制备多克隆抗体,Western blot法检测抗体特异性,间接ELISA检测抗体效价.结果:成功构建pGEX-6P-2-EGF和pGEX-6P-2-SP,并表达GST-EGF、GST-SP两种融合蛋白;制备出两种目的片段的多克隆抗体,特异性高,与其他蛋白无交叉反应,间接ELISA测定EGF抗体效价大于1∶32000,SP抗体效价大于1∶40000.结论:获得了MASP-2的EGF、SP两个功能区蛋白的多克隆抗体,特异性强,效价高.

关键词：MASP-2、功能区、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：28

分类号：R392.11

在线出版日期：2013-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1295-1299