舌鳞癌Tca 8113细胞过表达Twist1促进其侵袭

摘要：

目的:构建人Twist1真核表达载体并检测舌鳞癌Tca8113中过表达Twist1与侵袭转移的关系.方法:从Tca8113细胞中提取mRNA,反转录为cDNA,利用特异PCR引物扩增Twist1基因,将其定向克隆至pcDNA3.1-myc-hisA载体,融合蛋白表达载体命名为Myc-Twist1.将Myc-Twist1转染到Tca8113细胞系中,Western blot法检测蛋白表达.共聚焦激光扫描显微镜观察Twist1在Tca8113细胞中的定位.荧光素酶报告基因检测Myc-Twist1对上皮性钙粘素(E-cadherin)启动子活性调节.Transwell检测稳定表达Myc-Twist1的Tca8113细胞侵袭能力.结果:成功构建真核表达载体Myc-Twist1,Western blot法检测到Myc-Twist1融合蛋白表达.人Twist1主要定位于细胞核,少量定位于细胞质.Twsit1明显抑制E-cadherin的启动子活性,增强细胞侵袭能力.结论:Twist1能通过调控E-cadherin的表达促进Tca8113细胞的侵袭.

关键词：Twist1、真核表达载体、免疫荧光、侵袭转移

所属期刊栏目：28

分类号：R392-33;R739.81

资助基金：国家自然科学基金30871390, 30800415

在线出版日期：2013-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1246-1249