抗基质金属蛋白酶-2单克隆抗体的制备、鉴定及其应用

摘要：

目的:制备和鉴定基质金属蛋白酶-2(MMP-2)单克隆抗体(mAb),检测其在人卵巢癌组织和裸鼠移植瘤中的表达.方法:利用戊二醛法制备人工抗原MMP-2-BSA和MMP-2-KLH,并免疫小鼠,采用标准杂交瘤技术,亚克隆筛选出单克隆细胞株,制备腹水,采用辛酸-硫酸铵法纯化mAb.以ELISA、Western blot法对抗体进行鉴定.通过免疫组织化学法与商品化多抗进行对比,并联合CA125将自制抗体应用于临床人卵巢癌组织和裸鼠移植瘤的检测.结果:人工抗原MMP-2-BSA和MMP-2-KLH合成成功.获取3株稳定分泌抗MMP-2的杂交瘤细胞株(3G10、4D12、1E8),抗体亚型均为IgG1.其中3G10反应性最强.经间接ELISA法检测纯化后抗体的效价达1∶1×106.自制mAb应用于人卵巢癌组织切片和裸鼠模型检测,卵巢癌组织与正常组织之间表达差异有统计学意义(P＜0.01).卵巢癌患者CA125和MMP-2联合检测阳性率较单一检测高(P＜0.01).自制mAb的染色特性与商品化抗体相似,且检出率较商品化多抗高(P＜0.01).结论:采用人工合成多肽作为免疫原成功制备了与卵巢癌相关的特异性抗MMP-2 mAb.

关键词：基质金属蛋白酶-2、单克隆抗体、卵巢癌、裸鼠、联合检测

所属期刊栏目：28

分类号：R392.11;R392-33

资助基金：国家"重大新药创制"科技重大专项2008ZX09203-003;安徽省教育厅自然科学基金KJ2011B155;淮南联合大学校级科研项目CYB1002

在线出版日期：2013-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1177-1181