人多梳蛋白2不同功能片段真核表达载体的构建及表达
目的:构建HPC2不同截短功能片段的真核表达载体,并检测各片段在骨肉瘤U2OS细胞中的表达.方法:以质粒pcDNA3.2-V5/HPC2为模板,分别设计各片段PCR引物进行扩增,EcoR I酶切鉴定PCR产物,正确的PCR产物进行连接后转化到DH5α感受态细胞中并涂板筛选,从而得到带有V5标签的不同截短动能片段的表达载体,提取质粒并转染U20S细胞,Western blot法鉴定目标蛋白的表达.结果:测序及酶切的结果均表明HPC2不同功能片段的真核表达载体构建成功,并能够在U2OS细胞中表达.结论:成功构建了HPC2不同功能域片段的真核表达载体.
HPC2、基因表达、截短功能域
28
R392-33;Q74
国家自然科学基金81071549
2012-12-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1064-1066