代谢相关药物对3T3-L1脂肪细胞促酰化蛋白分泌的影响
目的:建立使用3T3-L1脂肪细胞评价药物影响促酰化蛋白(ASP)分泌的细胞模型和测定ASP分泌的ELISA方法,观察代谢相关药物二甲双胍、罗格列酮钠及立莫那班对ASP分泌的影响及机制,以及与补体C3、非酯化脂肪酸(NE-FA)释放、甘油三酯总量(TG mass)、脂肪酸摄取量的关系.方法:以3T3-L1前脂肪细胞为实验对象,诱导细胞分化,分别加入乳糜微粒、二甲双胍、罗格列酮钠及立莫那班作用48 h.采用ELISA法测定ASP、C3含量,使用酶标比色法测定NEFA含量,脂肪细胞FA摄取速度在荧光酶标仪进行动力学方法测量,采用分光光度法测定TG含量,考马斯亮蓝染料结合法测定细胞总蛋白.结果:乳糜微粒刺激ASP分泌(达411% ±133% P<0.05);罗格列酮钠和立莫那班抑制ASP产生(-53%~- 85%,P<0.05),同时抑制前体蛋白C3分泌(- 37%~- 65%,P<0.05);二甲双胍抑制ASP分泌(-54%~- 100%,P<0.05),对前体蛋白C3分泌无影响;二甲双胍降低TG含量(达- 60%,P<0.05)和FA摄取速度(达-75%,P<0.05).结论:成功建立了评价药物影响促酰化蛋白( ASP)分泌的3T3-L1前脂肪细胞模型,并建立了测定ASP分泌的ELISA方法.
3T3-L1脂肪细胞、促酰化蛋白、药物
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R392-33;Q256
新疆维吾尔自治区自然科学基金2011211A079
2012-12-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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