EV71结构蛋白VP1的原核表达及VP1单克隆抗体的制备
目的:原核表达EV71结构蛋白VP1并制备其单克隆抗体.方法:以肠道病毒71型( EV71) P1基因为模板,设计引物扩增出目的片段VP1,将其连接至大肠杆菌表达载体pET-32a(+)上,转化大肠杆菌TG1,筛选出阳性克隆后进行测序.将重组表达载体pET-32a (+)-VP1转化大肠杆菌表达菌株BLgold( DE3),对该工程菌进行诱导表达,SDS-PAGE电泳分析,表达产物以包涵体的形式存在.包涵体用6 mol/L盐酸胍溶解,经过Ni-NTA亲和层析法纯化,获得了纯度较高的目的蛋白.用纯化的VP1蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体(mAb).结果:获得了24株mAb,其中1株EV71 Western blot法鉴定呈阳性,5株EV71间接免疫荧光法(IFA)鉴定阳性.结论:成功地制备了VP1的mAb.
肠道病毒71型、VP1、单克隆抗体
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R392.1;R392-33
广州经济技术开发区立项项目2010Q-P155;广东省科技项目2011A08052006
2012-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
956-959
