人可溶型FcγRIIb的制备及其功能初步研究

摘要：

目的:检测正常人和SLE患者血清中可溶型FcγRIIb( husFcγRIIb)含量,诱导表达并纯化人可溶性FcγRIIb,检测其与血清中免疫复合物结合力及对B细胞抗体分泌功能的影响.方法:ELISA法检测人血清中可溶型FcγRIIb含量,IPTG诱导含有pET-sFcγRIIb的大肠杆菌BL21,镍琼脂糖磁珠纯化目的蛋白,可溶型FcγRIIb包被ELISA板,ELISA方法检测其与血清中免疫复合物结合能力,免疫磁珠法分选B细胞,分组刺激培养,ELISA检测培养物上清中IgM含量.结果:SLE患者血清中可溶型FcγRIIb浓度低于正常人(P＜0.05)；诱导表达并纯化获得相对分子质量(Mr)为41 500的重组蛋白；重组可溶型FcγRIIb可以与血清中免疫复合物结合,二者孵育后吸光度(A)值随血清中免疫复合物浓度逐渐增高,至受体结合度饱和时达最大；不同刺激条件下B细胞培养10 d,各实验组抗体浓度均高于细胞对照组(P＜0.01),SPA组、SPA+ husFcγRIIb组抗体浓度无显著差异(P＞0.05),SPA+ IgG型抗人IgM组抗体滴度明显高于SPA组(P＜0.01),SPA+husFcγRIIb+IgG型抗人IgM组抗体滴度明显低于SPA+ IgG型抗人IgM组(P＜0.01)、SPA组(P＜0.01)和SPA+ husFcγRIIb组(P＜0.01).结论:SLE患者血清中可溶性FcγRIIb含量低于正常人,重组人可溶性FcγRIIb可以与血清中免疫复合物结合,抑制免疫复合物对B淋巴细胞的激活,减少IgM型抗体的分泌.

关键词：FcγRIIb、可溶性、结合力、抗体分泌

所属期刊栏目：28

分类号：R392.12;R392-33

资助基金：国家自然科学基金81160375;宁夏教育厅高等学校科学研究项目NGY2011053

在线出版日期：2012-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：952-955