人源性抗乳腺癌单链抗体库的筛选与初步鉴定

摘要：

[目的]本研究旨在已构建的大容量人源性抗乳腺癌噬菌体单链抗体库的基础上,筛选出高亲和力的特异性单链抗体(scFv)并对抗体基本特性进行初步鉴定.[方法]以人乳腺癌细胞系MCF-7为靶标,经过4轮淘洗,筛选出高亲和力的特异性抗乳腺癌scFv,并对其结构序列进行分析；通过ELISA和Western blot方法,鉴定scFv的亲和力和特异性,以及其蛋白的基本表达情况.[结果]成功构建具有高亲和力的抗乳腺癌单链抗体库,获得scFv的长度约为750 bp,ELISA证实所得抗体对乳腺癌细胞具有良好的亲和力和高度的特异性,IPTG诱导表达及Western blot结果显示,scFv为相对分子质量(Mr)30 000的可溶性蛋白.[结论]本研究在已构建的大容量抗乳腺癌单链抗体库的基础上,筛选获得了高亲和力的抗乳腺癌单链抗体库.研究结果为进一步获得可应用于临床诊断和治疗的乳腺癌靶向性抗体奠定了良好的基础.

关键词：单链抗体、乳腺癌、人源性、噬菌体抗体库、筛选、表达

所属期刊栏目：28

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金81070249;国家"重大新药创制"科技重大专项2009ZX09102-226

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：837-840