醛酮还原酶AKR7A5蛋白的纯化及其对萘醌类化合物的底物特异性研究

摘要：

[目的]探讨小鼠醛酮还原酶AKR7A5蛋白对萘醌及其衍生物的底物特异性.[方法]IPTG(异丙基硫代半乳糖糖苷)诱导BL21pLysS大肠杆菌中His标签的AKR7A5融合蛋白大量表达,利用FPLC系统通过HiTrap亲和柱纯化His-AKR7A5融合蛋白,经SDS-PAGE和Western blot法鉴定纯化的AKR7A5蛋白.使用AKR酶活性实验检测纯化的重组AKR7A5蛋白对萘醌类化合物的底物特异性.[结果]经SDSPAGE和Western blot验证,成功纯化了His标签的AKR7A5融合蛋白；AKR酶活性实验结果显示,重组AKR7A5蛋白对散沫花醌有中等亲和力,对胡桃醌和维生素K3有较低的亲和力,对1,4-萘醌无亲和力.[结论]成功纯化了重组AKR7A5蛋白,并检测了其对萘醌类化合物的底物特异性,结果表明醛酮还原酶很可能选择性地参与萘醌类化合物的代谢.

关键词：醛酮还原酶、萘醌类化合物、蛋白纯化、底物特异性

所属期刊栏目：28

分类号：R392.1;Q55

资助基金：沈阳市科学技术计划1091142-9-00;辽宁省自然科学基金21012295

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：825-827