肠道病毒71型多表位-mGITRL真核表达质粒的构建、表达及其免疫原性研究

摘要：

[目的]构建肠道病毒71型(EV71)多表位-mGITRL 真核表达质粒并对其免疫原性进行研究.[方法]串联已证实的VP1表位并合成(VP1’)；PCR扩增获得mGITRL,克隆至真核共表达载体pIRES中.对重组质粒进行测序鉴定后,以脂质体介导法转染至COS7细胞,通过Western blot方法检测其在COS7细胞中的表达.将构建好的重组质粒免疫小鼠,应用ELISA法检测小鼠血清中抗VP1的抗体滴度.[结果]PCR扩增出目的基因,测序证实真核共表达载体pIRES-VP1’-mGITRL构建成功,Western blot结果显示目的基因在COS7细胞和肌细胞中过表达.小鼠血清中检测出高滴度的抗VP1抗体.[结论]成功扩增出目的基因并构建VP1表位的重组真核共表达载体pIRES-VP1’-mGITRL,在COS7细胞和肌细胞中过表达,并获得高滴度的抗VP1抗体.

关键词：EV71、VP1、mGITRL、表位

所属期刊栏目：28

分类号：R183.4(流行病学与防疫)

资助基金：镇江市医学重点人才项目2010年

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：797-800