免疫磁性活化细胞分选方法优化及纯化后细胞的生物学特性检测

摘要：

目的:改良常规免疫磁性活化细胞分选(MACS)的分离纯化方法,提高分选后细胞的纯度并确保细胞仍具有良好活性及功能.方法:以干细胞抗原-1(Sca-1)标记的Sca-1+造血干/祖细胞(Sca-1+ HSC/HPC)为例,分别用改良后和常规MACS法分选出小鼠骨髓细胞Sca-1+细胞,流式细胞术检测两种分选方法获得Sca-1+细胞纯度；计算阳性细胞回收率；台酚蓝染色检测分选细胞存活百分率；CCK-8检测细胞增殖,混合造血祖细胞( CFU-Mix)体外培养评价分选Sca-1+细胞分化能力.结果:改良MACS法分选获得的Sca-1+细胞纯度达93％以上(常规MACS法仅为87％),阳性细胞的回收率可达73％(常规法仅为62.3％)；细胞存活率、细胞增殖和CFU-Mix集落形成能力两种分选方法无明显差别.结论:改良法能明显提高细胞分选纯度及回收率,细胞活性和功能保持良好,值得各种细胞免疫磁性分选参考采用.

关键词：免疫磁性活化细胞分选、方法、干细胞抗原-1、生物学特征

所属期刊栏目：28

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金81173398

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：752-754